L'agar è un polimero usato per far crescere i batteri. L'agar viene prima fornito come polvere e, sciolto in acqua bollente e raffreddato, solidifica su una superficie solida per la crescita batterica. Esistono molti tipi diversi di agar che possono essere utilizzati per far crescere i batteri di interesse, a seconda delle specie e delle esigenze di ricerca. L'agar nutritivo è popolare perché può crescere una varietà di tipi di batteri e funghi e contiene molti nutrienti necessari per una robusta crescita batterica.
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Componenti dell'agar nutritivo
L'agar nutriente contiene lo 0,5 per cento di peptone, che è un digest enzimatico delle proteine animali. Il peptone è la principale fonte di azoto organico per i batteri in crescita. L'agar nutritivo contiene anche lo 0,3% di estratto di manzo, che contiene sostanze idrosolubili che favoriscono la crescita batterica, come vitamine, carboidrati, composti organici dell'azoto e sali. L'ultimo componente dell'agar nutritivo è l'1,5% di agar, che è l'agente di solidificazione.
Come rendere agar nutriente
Sciogliere i componenti elencati in precedenza nel volume d'acqua desiderato. Per ottenere 1 litro di agar nutriente, aggiungere 5 grammi di peptone, 3 grammi di estratto di manzo e 15 grammi di agar e assicurarsi che il volume finale di questa miscela sia di 1 litro aggiungendo acqua distillata. Riscaldare questa miscela mescolando per dissolvere completamente tutti i componenti. Autoclave della miscela disciolta a 121 gradi Celsius per 15 minuti sul ciclo del liquido.
Come versare le piastre di agar nutritive
Una volta che l'agar nutritivo è stato sterilizzato in autoclave, lasciarlo raffreddare ma non solidificare. Aggiungi antibiotici a questo punto se lo desideri. Togliere i coperchi e distribuire il numero appropriato di piastre di Petri su una superficie sterile. In generale, 1 litro di agar verserà circa 50 grandi piastre di Petri - 100 millimetri di diametro - o 100 piccole piastre di Petri - 60 millimetri di diametro. Accendere una fiamma nelle vicinanze per mantenere sterile anche l'area intorno alle piastre. Quando si apre la bottiglia di agar, passare l'apertura attraverso la fiamma per sterilizzarla. Versare l'agar nutriente in ogni piastra e lasciare le piastre sulla superficie sterile fino a quando l'agar si è solidificato. Sostituire il coperchio di ciascuna capsula di Petri e conservare le piastre in frigorifero.
Consigli per versare e conservare le lastre
Riempire ogni piastra da metà a due terzi. Cerca di eliminare tutte le bolle d'aria, poiché potrebbero rendere difficile la diffusione dei batteri sulla piastra una volta solidificati. Le bolle possono essere spuntate usando la fiamma. Conservare le piastre di agar capovolte nel frigorifero. Questo eviterà che la condensa sul coperchio della capsula di Petri goccioli sull'agar solidificato. Se si conservano le piastre a lungo termine, controllare la crescita batterica o l'asciugatura prima di utilizzarle.Le piastre contenenti antibiotici devono essere utilizzate entro 2 settimane dalla preparazione.
